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新手养细胞心得
点击次数:173 发布时间:2019-03-25

我养细胞1个月了,经历了失望-绝望-希望的过程,现在把学到的几点注意问题跟大家分享一下,希望能够对新手们稍有帮助,也欢迎高手指教:

 

1。 细胞不要过度消化,有些贴壁不牢的如293T,加入胰酶在台子里晃晃就可以了,不用放到温箱中;

 

2。 传代时,细胞分的稀了或者分的不均匀,形成单细胞的克隆群,细胞就会长成密密麻麻的一群,如293T会成为小方块状,而不是正常的不规则形状,这时候,即使没有长满盘,也应该消化重新铺板。

 

3. 贴壁细胞的上清看起来清亮、颜色正常时,即使在镜下检测有些悬浮物,一般不是污染而是死细胞,尤其是复苏的细胞,由于有死细胞,会有很多悬浮物。(我以前看到有悬浮物就以为污染了,还倒掉了好不容易借来复苏的一盘细胞,后悔中)。污染了会看到明显的悬浊液。

 

4. 不能让培养基变色,稍微变黄就应该传代,如果没有长满,可以换液,但是如果变黄了,细胞就会皱缩,或者死亡,大批量的浮起来。这时候就别挽救了。

 

5. 关于污染,刚开始做的时候,无论怎么小心,还是会莫名其妙的污染。师姐说是人生必经阶段。现在我也很赞同这个理论。所以,绝望后别放弃才会有希望!

 

祝新手同志们都能顺利的迈出养细胞的第一步!

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